单核苷酸变异是自然界中最常见的遗传变异类型,与众多疾病的发生发展密切相关。在临床检测中,如何从大量野生型基因背景中精准捕捉到微量的低频突变是一项较难攻克的技术瓶颈。
万振洲主任团队与复旦大学附属公共卫生临床中心张驰宇教授团队长期合作,成功研发出PROBE检测方法。该方法创新性地结合了RNase H2介导的核糖核苷酸引物特异性切割与PNA/LNA阻断探针介导的竞争性抑制双重机制,实现了对突变模板的选择性扩增和对野生型模板扩增的高效抑制。
研究数据显示,PROBE方法完全抑制野生型模板扩增,检测灵敏度达到每反应200拷贝,在模拟样本中可稳定检出0.1%的低丰度突变,展现出卓越的检测性能。